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過氧化氫酶
催化過氧化氫分解成氧和水的酶
基本信息
| 中文名 | 過氧化氫酶 |
| 外文名 | CATALASE FROM MICROCOCCUS LYSODEIKTICUS |
| 別名 | 自溶血性鏈球菌分離的過氧化氫酶 |
| 應(yīng)用 | 食品、紡織等 |
| 發(fā)現(xiàn)者 |
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簡介
過氧化氫(H2O2)即人們熟知的雙氧水，比水(H2O)多了一個(gè)氧原子(0),這個(gè)氧原子極不穩(wěn)定，總想從別的物質(zhì)分子中再奪取一個(gè)氧原子，形成O2。平時(shí)我們用雙氧水殺菌消毒，就是因?yàn)榧?xì)菌遭到H2O2的破壞而死亡，消毒時(shí)起泡是產(chǎn)生氧氣的結(jié)果。然而，過氧化氫可穿透大部分細(xì)胞膜，因此它比超氧陰離子自由基(不能穿透細(xì)胞膜)具有更強(qiáng)的細(xì)胞毒性，穿透細(xì)胞膜后可與細(xì)胞內(nèi)的鐵發(fā)生反應(yīng)生成羥基自由基。過氧化氫酶(CAT)是抗氧化酵素系統(tǒng)的重要一員，又被稱為觸酶，是以鐵卟啉為輔基的結(jié)合酶。SOD酵素將氧自由基歧化后生成過氧化氫(H2O2)和氧氣(O2),過氧化氫在體內(nèi)仍然是具有氧化劑毒性的物質(zhì)，過氧化氫酶的作用就是促使過氧化氫分解為分子氧和水，使細(xì)胞免于遭受H2O2的毒害。CAT作用于過氧化氫的機(jī)理實(shí)質(zhì)上是過氧化氫的岐化，必須有兩個(gè)H2O2分子先后與CAT相遇且碰撞在活性中心上，才能發(fā)生反應(yīng)。H2O2濃度越高，分解速度越快幾乎所有的生理機(jī)體，都存在過氧化氫酶。其普遍存在于能呼吸的生物體內(nèi)，主要存在于植物的葉綠體、線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)以及動(dòng)物的肝和紅細(xì)胞中其酶促活性為機(jī)體提供了抗氧化防御機(jī)理。過氧化氫酶的生物功能是在細(xì)胞中促進(jìn)過氧化氫分解，使其不會(huì)進(jìn)一步產(chǎn)生毒性很大的氫氧自由基，從而保護(hù)抗氧化酵素系統(tǒng)的功能作用，對(duì)于人體的生長發(fā)育和代謝活動(dòng)亦具有重要意義。
閻世英編著，酵素決定健康，中國醫(yī)藥科技出版社,2015.12
過氧化氫酶的作用是使過氧化氫還原成水： 2H2O2=O2↑+ 2H2O
過氧化氫酶
中文名稱：過氧化氫酶
英文別名:Fungal catalase; catalase from bovine liver; catalase F. bov. liv.,cryst.susp. in H2O; Catalase from microorganisms; catalse from bovine liver; catalase from human erythrocytes; catalase from dog liver; catalase from mouse liver; catalase from bison liver; Catalase (bovine liver); Catalase, Human Erythrocytes; Catalase Aspergillus niger; Catalase from Corynebacterium glutamicum; Catalase Micrococcus lysodeikticus; Catalase
CAS:9001-05-2
過氧化氫酶
EINECS:232-577-1
EC 1.11.1.6
觸酶
過氧化氫酶（CAT）是一種酶類清除劑，又稱為觸酶，是以鐵卟啉為輔基的結(jié)合酶。它可促使H2O2分解為分子氧和水，清除體內(nèi)的過氧化氫，從而使細(xì)胞免于遭受H2O2的毒害，是生物防御體系的關(guān)鍵酶之一。CAT作用于過氧化氫的機(jī)理實(shí)質(zhì)上是H2O2的歧化，必須有兩個(gè)H2O2先后與CAT相遇且碰撞在活性中心上，才能發(fā)生反應(yīng)。H2O2濃度越高，分解速度越快。
分解酶
這是一種穩(wěn)定的過氧化氫分解酶，能將過氧化氫分解成水和氧氣，而對(duì)纖維和染料沒有影響，因而漂白后染色前，通過H2O2 分解酶去除漂白織物上和染缸中殘留的過氧化氫，以避免纖維的進(jìn)一步氧化和染色時(shí)染料的氧化。同時(shí)能縮短加工時(shí)間，減少水洗用水，降低廢水量。尤其對(duì)紗線、筒子紗和針織物更為適用。同樣，過氧化氫分解酶隨pH 值和溫度的改變，其活力隨之變化，在pH7 左右和30～40 ℃活性最大。過氧化氫濃度增大，會(huì)加快分解反應(yīng)速度，但必須注意當(dāng)濃度大于一定量時(shí)，酶的作用將減弱，這樣過多地殘留H2O2 對(duì)纖維和染料是不利的。所以不能因?yàn)橛辛薍2O2 分解酶，就能任意地加大H2O2 的用量。使用時(shí)，通常要注意H2O2 分解酶對(duì)常用表面活性劑和H2O2 穩(wěn)定劑的相容性，實(shí)際生產(chǎn)應(yīng)用pH為6～8，溫度20～55 ℃，每用量5～10KCLU/ 升，時(shí)間10～20min。此技術(shù)已慢慢地被國內(nèi)所認(rèn)識(shí)和接受，它對(duì)提高活性染料色澤鮮艷度很有利。
來源
幾乎所有的生物機(jī)體都存在過氧化氫酶。其普遍存在于能呼吸的生物體內(nèi)，主要存在于植物的葉綠體、線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、動(dòng)物的肝和紅細(xì)胞中，其酶促活性為機(jī)體提供了抗氧化防御機(jī)理。
CAT是紅血素酶，不同的來源有不同的結(jié)構(gòu)。在不同的組織中其活性水平高低不同。過氧化氫在肝臟中分解速度比在腦或心臟等器官快，就是因?yàn)楦沃械腃AT含量水平高。
反應(yīng)機(jī)制
雖然過氧化氫酶完整的催化機(jī)制還沒有完全被了解，但其催化過程被認(rèn)為分為兩步：
H2O2 + Fe(III)-E → H2O + O=Fe(IV)-E(.+)
H2O2 + O=Fe(IV)-E(.+) → H2O + Fe(III)-E + O2[12]
其中，“Fe()-E”表示結(jié)合在酶上的血紅素基團(tuán)（E）的中心鐵原子（Fe）。Fe(IV)-E(.+）為Fe(V)-E的一種共振形式，即鐵原子并沒有完全氧化到+V價(jià)，而是從血紅素上接受了一些“支持電子”。因而，反應(yīng)式中的血紅素也就表示為自由基陽離子（.+).
過氧化氫進(jìn)入活性位點(diǎn)并與酶147位上的天冬酰胺殘基（Asn147）和74位上的組氨酸殘基（His74）相互作用，使得一個(gè)質(zhì)子在氧原子間互相傳遞。自由的氧原子配位結(jié)合，生成水分子和Fe(IV)=O。Fe(IV)=O與第二個(gè)過氧化氫分子反應(yīng)重新形成Fe(III)-E，并生成水分子和氧氣。[12]活性中心鐵原子的反應(yīng)活性可能由于357位上酪氨酸殘基（Tyr357）的苯酚基側(cè)鏈的存在（幫助Fe(III）氧化為Fe(IV））而得以提高。反應(yīng)的效率可能是通過His74和Asn147與反應(yīng)中間體作用而得以提高。[12]該反應(yīng)的速率通常可以通過米氏方程來確定。[2]
H2O2 + H2R → 2H2O + R
同樣，具體的反應(yīng)機(jī)制還不清楚。
處于過氧化狀態(tài)的過氧化氫酶中間體的三維結(jié)構(gòu)已經(jīng)獲得解析，可以在蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫中檢索到。
檢測(cè)
進(jìn)行中的過氧化氫酶檢測(cè)，可以觀察到氣泡。
過氧化氫酶檢測(cè)是微生物學(xué)家鑒定細(xì)菌種類的主要的三種檢測(cè)手段之一，即用過氧化氫來檢測(cè)過氧化氫酶是否存在。假如細(xì)菌中含有過氧化氫酶，則在過氧化氫溶液中加入少量細(xì)菌提取物就能觀察到氧氣氣泡生成。
有氣泡生成，則該菌被認(rèn)為是呈“過氧化氫酶陽性”。如staphylococcus和micrococcus。沒有，則該菌被認(rèn)為是呈“過氧化氫酶陰性”。如streptococcus和enterococcus。雖然過氧化氫酶檢測(cè)無法鑒定特定生物體，但與其他檢測(cè)方法結(jié)合，它可以有效地幫助診斷。
此外細(xì)菌中是否存在過氧化氫酶，還取決于細(xì)胞生長條件和所使用的培養(yǎng)基。
分布
過氧化氫酶存在于所有已知的動(dòng)物的各個(gè)組織中，特別在肝臟中以高濃度存在。在投彈手甲蟲（bombardier beetle）中，過氧化氫酶具有獨(dú)特用途。這種甲蟲具有兩套分開儲(chǔ)存于腺體中的化學(xué)物。大的腺體中儲(chǔ)存著對(duì)苯二酚和過氧化氫，而小的腺體中儲(chǔ)存著過氧化氫酶和辣根過氧化物酶。當(dāng)甲蟲將兩個(gè)腺體中的化學(xué)物質(zhì)混合在一起時(shí)，就會(huì)釋放出氧氣，而氧氣既可以氧化對(duì)苯二酚又可以作為助推劑。
過氧化氫酶也普遍存在于植物中，但不包括真菌，雖然有些真菌被發(fā)現(xiàn)在低pH值和溫暖的環(huán)境下能夠產(chǎn)生該酶。
絕大多數(shù)需氧微生物都含有過氧化氫酶[4]。例外包括Streptococcus，一種沒有過氧化氫酶的需氧細(xì)菌。部分厭氧微生物，如Methanosarcina barkeri，也含有過氧化氫酶。
應(yīng)用
功能
功能概述
過氧化氫是一種代謝過程中產(chǎn)生的廢物，它能夠?qū)C(jī)體造成損害。為了避免這種損害，過氧化氫必須被快速地轉(zhuǎn)化為其他無害或毒性較小的物質(zhì)。而過氧化氫酶就是常常被細(xì)胞用來催化過氧化氫分解的工具。
但過氧化氫酶真正的生物學(xué)重要性并不是如此簡單：研究者發(fā)現(xiàn)基因工程改造后的過氧化氫酶缺失的小鼠依然為正常表現(xiàn)型，這就表明過氧化氫酶只是在一些特定條件下才對(duì)動(dòng)物是必不可少的。
一些人群體內(nèi)的過氧化氫酶水平非常低，但也不顯示出明顯的病理反應(yīng)。這很有可能是因?yàn)檎２溉閯?dòng)物細(xì)胞內(nèi)主要的過氧化氫清除劑是過氧化物還原酶（peroxiredoxin），而不是過氧化氫酶。
當(dāng)細(xì)胞被病原體感染時(shí)，過氧化氫可以被用作一種有效的抗微生物試劑。部分病原體，如結(jié)核桿菌、嗜肺軍團(tuán)菌和空腸彎曲菌，能夠生產(chǎn)過氧化氫酶以降解過氧化氫，使得它們能在宿主體內(nèi)存活。
歷史
疾病
過氧化物酶體異常（peroxisomal disorder）過氧化物酶缺乏癥（acatalasia）是由過氧化氫酶功能缺陷所造成的。
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